Питательные среды Раппопорта, Эндо, Левина, Рессела, Клиглера: тип среды, состав, назначение, принцип действия. Питательная среда с эозин-метиленовым синим для выделения и дифференциации энтеробактерий (Среда Левина) Плотная питательная среда для выделени

Практика

Плотные среды

Висмут-сульфит агар

______________________________________________

Паратиф А Сальмонеллез

Готовая среда непрозрачна зелено-горохового цвета. Строго селективная среда для выделения чистых культур сальмонелл. Salmonella typhi, Salmonella enteritidis и Salmonella typhimurium обычно образуют на этой среде черные колонии с металлическим блеском, окруженные зоной почернения в результате продукции сероводорода и восстановления сульфита до сульфида железа, имеющего черный цвет. Salmonella paratyphi A образует светло-зеленые колонии.

Эталон ответа: На плотной среде «Висмут-сульфит агар» обнаружены мелкие колонии. Гладкие с ровным краем, темные и непрозрачные с металлическим блеском.

______________________________________________

Среда Левина

Эталон ответа: На данной среде – среде Левина обнаружены мелкие гладкие колонии с ровным краем сине-фиолетового цвета с металлическим блеском, с ферментированием лактозы до кислоты. Индикатор – метиленовая синька. Предварительный диагноз – колиэнтерит, вызванный кишечной палочкой - Escherichia coli .

Эталон ответа: Данная среда – среда Левина, сделанная с целью получения изолированных колоний. На среде обнаружены мелкие гладкие прозрачные неокрашенные колонии, и ферментирование лактозы – отсутствует. Преддиагноз – дизентерия, вызванная возможными возбудителями:

Серогруппа A: Shigella dysenteriae (10 сероваров)

Серогруппа B: S. flexneri (6 сероваров и подтипы)

Серогруппа C: S. boydii (15 сероваров)

Серогруппа D: S. sonnei (1 сероваров)

______________________________________________

Среда Эндо

______________________________________________

Эталон ответа: Данная среда является средой Эндо. На ней обнаружены мелкие бесцветные, прозрачные, гладкие с ровным краем колонии. Разложение лактозы до кислоты отсутствует, о чем говорит данные цвет среды. Использован индикатор Андраде. Предполагаемый диагноз – брюшной тиф, вызванный Salmonella Typhi .

Эталон ответа: Данная среда используется для накопления изолированных колоний. Среда – Эндо. Обнаружены мелкие гладкие с ровным краем, красные с металлическим блеском из-за разложении лактозы до кислоты с использованием индикатора Андраде. Предварительный диагноз – колиэнтерит, вызванный кишечной палочкой - Escherichia coli .

______________________________________________

Методы определения чувствительности к антибиотикам

______________________________________________

Эталон ответа: В чашке Петри представлен метод определения чувствительности к антибиотикам – метод бумажных дисков, при котором на поверхность агара в чашке Петри наносят бактериальную суспензию и затем помещают диски, содержащие определенное количество антибиотика. Диффузия антибиотика в агар приводит к формированию зоны подавления роста микроорганизмов вокруг дисков. После инкубации чашек в термостате при температуре 35 о -37 о С в течение ночи учитывают результат путем измерения диаметра зоны вокруг диска в миллиметрах.

Выделенная культура высоко чувствительна к мономицину, диаметр к задержке роста равен 30 мм, неомицина – 26 мм, канамицина – 20, а левомицитина – нет вообще. Характерно для кишечной палочкой - Escherichia coli .

______________________________________________

Посев из воздуха

______________________________________________

Эталон ответа: На данном пластинчатом агаре произведен посев из воздуха седиментационным методом. Показанием загрязненности воздуха закрытого помещения является общее количество бактерий на 1 кубический метр. Определяется количество бактерий за 10 минут. Для этого чашку Петри с пластинчатым МПА оставляют открытой на воздухе в течение 10 минут, затем инкубируют в термостате при температуре 37 градусов, сутки. Результаты подсчитывают по суммарному количеству колоний. Норма в операционной перед операцией равна – 3-5 колонии. После – 15. Также существует аспирационный метод, где воздух оценивают специальным прибором Кротового.

______________________________________________

Смесь микроорганизмов

______________________________________________

Цветной ряд

______________________________________________

Дизентерия

______________________________________________

МПБ (для опред протеолитических св-в): H2S-; Индол-;

Маннит: Кислота+; Газ-;

Мальтоза: Кислота+; Газ-;

Среда Пешкова: рост по уколу, цвет изменился в красный, что говорит о ферментации маннита до кислоты. Индикатор – Андраде;

______________________________________________

Кишечная палочка

______________________________________________

МПБ (для опред протеолитических св-в): H2S+(почернела); Индол+(покраснела);

Глюкоза: Кислота+; Газ+;

Лактоза: Кислота+; Газ+;

Мальтоза: Кислота+; Газ+;

Сахароза: Кислота-; Газ-;

Среда Пешкова: помутнение всего столбика (культура подвижна), цвет изменился в красный, что говорит о ферментации маннита до кислоты и наличие пузырьков газа. Индикатор – Андраде;

Среда Ресселя (Индикатор – бромтимоловый синий): Скос и столбик имеет желтый цвет, а в толще – газ, что свидетельствует о разложении лактозы и фруктозы до газа и кислоты.

Брюшной тиф

______________________________________________

Среда Гисса (Индикатор – водно-розоловый):

Глюкоза: Кислота+; Газ-;

Мальтоза: Кислота+; Газ-;

Маннит: Кислота+; Газ-;

Лактоза: Кислота-; Газ-;

Сахароза: Кислота-; Газ-;

Среда Пешкова: помутнение всего столбика (культура подвижна), цвет изменился в красный, что говорит о ферментации маннита до кислоты. Газ – отсутствует. Индикатор – Андраде;

______________________________________________

Сальмонеллез

______________________________________________

МПБ (для опред протеолитических св-в): H2S+(почернела); Индол-;

Среда Гисса (Индикатор – водно-розоловый):

Мальтоза: Кислота+; Газ-;

Сахароза: Кислота-; Газ-;

Среда Пешкова: помутнение всего столбика (культура подвижна), цвет изменился в красный, что говорит о ферментации маннита до кислоты и газа. Индикатор – Андраде;

Среда Ресселя (Индикатор – бромтимоловый синий): Скос имеет неизмененный цвет, а столбик - желтый цвет. В толще – газ, что свидетельствует о разложении фруктозы до газа и кислоты, лактоза – неферментированна.

______________________________________________

Газовая гангрена

______________________________________________

Среда Китта-Тароцци: жидкая среда для культивирования анаэробов. Для ее приготовления нарезанную мелкими кусочками печень (мясо) заливают трехкратным количеством МПБ, кипятят 30 мин, фильтруют. Просушенные кусочки печени раскладывают (для адсорбции кислорода) в пробирки и заливают бульоном. Стерилизуют при 120°С в течение 30 мин. Перед использованием прогревают и заливают стерильным нейтральным парафиновым маслом.

На данной среде обнаружен рост в виде помутнения. Также есть газообразование.

______________________________________________

Ботулизм

______________________________________________

Среда Вейнберга: полужидкая питательная среда, применяемая для культивирования патогенных анаэробов, представляющая собой мясопептонный бульон, содержащий 1% агара и 0,2% глюкозы;

В столбике сахарного агара обнаружены мелкие, дискообразные, пушинчатые колонии. Среда разорвана из-за повышенного образования газа при ферментации глюкозы.

Производят распил. Пастеровской пипеткой или иглой берут часть колоний и помещают в среду Китта-Тароцци, для накопления.

______________________________________________

Реакция агглютинации (развернутая)

______________________________________________

NB!: Друзья, не забываем, что читать реакции нужно с конца – проверка контроля сыворотки и антигена. После у вас, скорее всего, спросят определение титра агглютинирующей сыворотки (максимальное разведение сыворотки, при котором происходит агглютинация с соответствующим микроорганизмом ) и титра диагностической сыворотки (титр антител к конкретному возбудителю болезни в сыворотке крови, выявляемый у больных и не наблюдающийся у здоровых людей ).

Эталон ответа: Данная реакция представляет собой развернутую реакцию агглютинации. Контроль сыворотки представлен в виде прозрачной жидкости и является отрицательным. В контроле антигена – помутнение, тоже отрицательный. Смотрим разведение 1/100 – прозрачная с зонтиком на дне, при встряхивании - хлопья, значит реакция положительная. И так до 1/6400 . Смотрим разведение 1/12800, заметно помутнение – реакция отрицательна.

Следовательно, реакция агглютинации положительна до разведения 1/6400, при отрицательных контролях, значит титр исследуемой сыворотки - 1/6400.

Реакция агглютинации - склеивание корпускул (бактерий, эритроцитов и др.) антителами в присутствии электролитов - натрия хлорида.

______________________________________________

Реакция связывания комплимента

______________________________________________

РСК основана на активации комплемента комплексом антиген-антитело.

Проходит в две стадии:

Инкубация смеси: антиген+антитело+комплемент

Индикаторная: выявление одного комплемента путем добавления гемолитической системы (эритроциты барана+гемолитическая сыворотка в тройном титре)

Эталон ответа: Произведен учет РСК с сыворотками больных 1 и 2 для выявления в них антител к соответствующему антигену. Реакция с сывороткой больного 2 – отрицательна, так как в первой стадии антитело и антиген не подошли друг другу и не связались, а значит они и не связали комплемент. Тогда свободный комплемент соединяется с гемолитической системой и происходит лизис. В сыворотке больного 1 обнаружена задержка гемолиза, значит комплекс «антитело+антиген+комплемент» образовался. Комплемент связан и не присоединяется к гемолитической системе. Гемолиз отсутствует. Диагноз положительный.

______________________________________________

Реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации

______________________________________________

В РНГА выявляют антитела сыворотки крови с помощью антигенного эритроцитарного диагностикума , который представляет собой эритроциты с адсорбированными на них антигенами.

РПГА ставят в пластиковых планшетках или в пробирках с разведениями сыворотки крови больного, к которым добавляют эритроцитарный диагностикум.

Эритроциты (или частицы латекса) с адсорбированными на них антигенами взаимодействуют с соответствующими антителами сыворотки крови, что вызывает склеивание и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка. При отрицательной реакции эритроциты оседают в виде пуговки.

Левина среда Левина среда

(лактозоэозинметиленовый агар) - дифференциально-элективная среда для выделения энтеробактерий. Позволяет отличить лактозоферментирующие (образуют темно-синие или черные колонии) от неферментирующих лактозу к-р (колонии цвета среды). Протей формирует изолированные оранжевые колонии. Среду готовят добавлением к 100 мл 1,5% МПА, рН 7,2 - 7,4, 2 мл 0,5% водного р-ра метиленового синего, 1,5 мл 2% р-ра эозина, 2 г лактозы и 0,2 г двухосновного калия фосфата, затем разливают ее по чашкам Петри. Среда имеет светло-фиолетовый цвет. Промышленность выпускает сухой препарат, к-рый готовят по указанию на этикетке. Вариант Л.с. -лактозобромти-моловая среда- не обладает ингибирующими св-вами против клебсиелл склеромы.

(Источник: «Словарь терминов микробиологии»)

Смотреть что такое "Левина среда" в других словарях:

- (М. Levine, род. в 1889 г., амер. бактериолог) плотная дифференциально диагностическая питательная среда для выявления не разлагающих лактозу патогенных бактерий сем. Enterobacteriaceae (возбудителей брюшного тифа, дизентерии и др.); состоит из… … Большой медицинский словарь

- (ые) (ы) искусственный субстрат, представляющий собой сбалансированную смесь питательных веществ в концентрациях и сочетаниях, необходимых для роста и деления микроорганизмов или клеток высших организмов. Питательная среда Адамса см. Адамса… … Медицинская энциклопедия

См. Левина среда … Большой медицинский словарь

См. Левина среда (Источник: «Словарь терминов микробиологии») … Словарь микробиологии

- (тетрабромфлюоресцеин) краситель (см. Красители) красного цвета и флюорохром зеленовато желтого цвета. Растворим в воде и этаноле. Применяют для крашения цитоплазмы и составе краски Романовского Гимзы, а также как ингибитор некоторых бактерий в… … Словарь микробиологии

У этого термина существуют и другие значения, см. Детская музыкальная школа № 1. Детская музыкальная школа №1 г. Пензы … Википедия

Культурологи ческие и социально психологические теории, описывающие и объясняющие человеч. поведение и социальную реальность через взаимодействие между людьми. Элементы Т.в. содержались в социологии Зиммеля, феноменологии Гуссерля и… … Энциклопедия культурологии

- (колиинфекции) заболевания, обусловленные бактериями рода Escherichia (см.). Облигатные энтеропатогенные варианты кишечной палочки вызывают специфическое заболевание колиэнтерит(см.). Клин, картина Э., обусловленных условно патогенными кишечными… … Словарь микробиологии

Общежитейский и науч. термин, обозначающий: 1) человеч. индивида как субъекта отношений и сознат. деятельности (лицо, в широком смысле слова) или 2) устойчивую систему социально значимых черт, характеризующих индивида как члена того или… … Философская энциклопедия

Т. п. была создана Куртом Левином, считавшим, что для понимания поведения необходимо принимать во внимание всю ситуацию целиком, т. е. гештальт ситуацию. Левин распространил свои идеи на новые области, взяв за образец мышления мат. построения… … Психологическая энциклопедия

Левина-ГРМ Оболенск Питательная среда с эозин-метиленовым синим для выделения и дифференциации патогенных и условно патогенных энтеробактерий, а также для выделения стафилококков, сухая.

Цена за упаковку 0,25 кг

ИНСТРУКЦИЯ по применению питательной среды с эозин-метиленовым синим сухой — Среда Левина-ГРМ Оболенск

НАЗНАЧЕНИЕ

Среда Левина-ГРМ Оболенск предназначена для бактериологических исследований в санитарной и клинической микробиологии с целью выделения и дифференциации патогенных и условно патогенных энтеробактерий, а также для выделения стафилококков.

характеристика

Среда Левина-ГРМ Оболенск представляет собой мелкодисперсный, гигроскопичный, светочувствительный порошок светло-сиреневого цвета.

Выпускается в полиэтиленовых банках по 250 г.

2.1. ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ

Наличие в среде эозина и метиленового синего придают ей селективные свойства.

Дифференцирующая способность среды основана на изменении рН среды под действием кислоты, образующейся при ферментации бактериями лактозы. Комплекс индикаторов в кислой зоне окрашивает колонии кислотообразующих бактерий в темно-фиолетовый цвет, некоторые колонии имеют зеленоватый металлический блеск.

2.2. СОСТАВ

Среда Левина-ГРМ Оболенск представляет собой смесь сухих компонентов из расчета, г/л:

АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

Среда Левина-ГРМ должна обеспечивать на всех засеянных чашках Петри рост тест-штаммов Shigella flexneri 1a 8516 и Escherichia coli 168/59 (O111:K58) через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С при посеве по 0,1 мл микробной взвеси культуры каждого тест-штамма из разведения 10 -7 , и рост тест-штамма Staphylococcus aureus 209-P (АТСС 6538-Р) через 48 ч инкубации при температуре (37±1) °С при посеве по 0,1 мл микробной взвеси культуры тест-штамма из разведения 10 -5 .

Дифференцирующие свойства среды. Питательная среда должна обеспечивать чёткую дифференциацию шигелл от эшерихий на всех засеянных чашках при посеве по 0,1 мл микробной смеси S. flexneri 1a 8516 и E. coli 168/59 (O111:K58) из разведения 10 -6 (в соотношении 1:1) через 18- 20 ч инкубации при температуре (37±1) °С.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

Потенциальный риск применения питательной среды в соответствии с Приказом
МЗ РФ №4н от 06.6.2012 — класс 2 а.

ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ

Термостат обеспечивающий температуру 37±1 °С
Весы лабораторные 2 класса точности
Автоклав
Пробирки стеклянные
Пипетки стеклянные позволяющие отбирать объемы жидкости 1 и 2 мл
Цилиндр стеклянный мерный вместимостью 1000 мл
Чашки Петри стерильные
Вода дистиллированная
Колбы
Воронки стеклянные

АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Объекты исследований в клинической лабораторной диагностике (кровь, желчь, моча, гной и т.д.).

Проведение АНАЛИЗа

Исследование проводят в условиях бактериологической лаборатории медицинскими специалистами.

7.1. Приготовление среды Левина-ГРМ Оболенск.

Порошок в количестве, указанном на этикетке для приготовления конкретной серии питательной среды, размешивают в 1 л дистиллированной воды, кипятят в течение 3 мин, фильтруют через ватно-марлевый фильтр и стерилизуют автоклавированием при температуре 110 °С в течение 20 мин. Стерильную среду охлаждают до температуры
45-50 °С, разливают в стерильные чашки Петри слоем 5-6 мм. После застывания среды чашки подсушивают при температуре (37±1)°С в течение 40-60 мин. Готовая среда в чашках Петри прозрачная, от светло-сиреневого до красновато-коричневого цвета.

Стерильную среду можно использовать в течение 3-х дней при условии ее хранения при температуре 2-8 C.

7.2. Взятие, посев инфицированного материала и учет результатов производят в соответствии с “Методическими указаниями по микробиологической диагностике заболеваний, вызванных энтеробактериями” (М., 1984 г) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 г., № 535 “Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений”.

7.3. Исследуемый материал стерильным шпателем тщательно втирают по всей поверхности среды. Инкубируют при температуре (37±1) °С в течение 46-48 ч.

РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ

Через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С визуально учитывают характер роста культур S. flexneri 1a 8516 и E.coli 168/59 (O111:K58) и через 46-48 ч характер роста культуры S.aureus 209-P (АТСС 6538-Р).

Колонии S.flexneri 1a 8516 должны быть круглыми, прозрачными, бесцветными или слабо-розовыми, диаметром 1,0-1,5 мм.

Колонии E.coli 168/59 (O111:K58) должны быть круглыми, темно-фиолетового цвета с зеленым металлическим блеском (возможно наличие отдельных колоний без металлического блеска), диаметром 1,5-2,0 мм.

Колонии S. aureus 209-P (АТСС 6538-Р) должны быть круглыми, бесцветными или светло-фиолетовыми с темным центром, диаметром до 1,0 мм.

УТИЛИЗАЦИЯ

Утилизация серий среды Левина-ГРМ Оболенск с истекшим сроком годности производится по
СанПиН 2.1.7.2790-10 как медицинские отходы, принадлежащие к классу «А» — эпидемиологически безопасные отходы.

Уничтожение среды Левина-ГРМ после проведения биологического контроля осуществляется по СанПиН 2.1.7.2790-10 как медицинские отходы, принадлежащие к классу «Б» с обязательным предварительным обезвреживанием путем автоклавирования в течение 2 ч при температуре (133±1) ˚С.

Обращение с медицинскими отходами следует выполнять согласно схеме, принятой в конкретной организации, осуществляющей медицинскую и (или) фармацевтическую деятельность. Данная схема разрабатывается в соответствии с требованиями вышеуказанных санитарных правил и утверждается руководителем организации.

УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ

ЛЕВИНА СРЕДА (M. Levine, амер. бактериолог, род. в 1889 г.; син. агар с эозином и метиленовым синим ) - цветная элективная питательная среда для дифференцирования бактерий сем. Enterobacteriaсеае, используется при лабораторной диагностике дизентерии, брюшного тифа, сальмонеллезов и других кишечных инфекций. Впервые агар с эозином и метиленовым синим был предложен в 1916 г. Холт-Харрисом и Тигом (J. E. Holt-Harris, О. Teague), позднее, в 1918 г., состав среды был модифицирован Левином.

Л. с. наряду с другими твердыми цветными дифференциально-диагностическими питательными средами для энтеробактерий нашла широкое применение в лаб. практике. С ее помощью удается в сравнительно большом проценте случаев обнаружить патогенную лактозонегативную микрофлору. Готовая Л. с. довольно стабильна, не изменяет своих свойств на свету или при хранении на протяжении нескольких дней; при ее изготовлении не требуется точного установления концентрации водородных ионов (pH). Входящие в состав Л. с. органические красители избирательно задерживают рост грамположительных бактерий, благодаря чему она одновременно является средой обогащения и дает относительно лучшие результаты при непосредственном посеве исследуемого материала, даже если он содержит сравнительно малое количество патогенных бактерий.

В зависимости от качества отдельных ингредиентов (пептона и в особенности красителей) получаемые на Л. с. результаты могут несколько варьировать, поэтому при изготовлении каждой новой серии среды желательно использование материалов одной и той же марки, что значительно облегчает распознавание колоний.

Известно несколько прописей и способов приготовления Л. с. (Ю. А. Козлов, Г. Я. Синай, О. Г. Биргер и др.). Наибольшее распространение получил способ, при к-ром раздельно готовят основную среду, р-ры лактозы и красителей, пригодные для сохранения впрок и смешиваемые перед употреблением.

Основная среда состоит из 10 г бактериологического пептона, 15 г агар-агара, 2 г фосфата калия двузамещенного (K2HPO4) и 1 л дистиллированной воды. Ее стерилизуют в автоклаве при 1 ат 15-20 мин., pH не исправляют.

При приготовлении дифференциальной среды на каждые 100 мл расплавленной основной среды при постоянном помешивании добавляют приготовленные на дистиллированной воде и предварительно простерилизованные текучим паром (дробно, 3 дня подряд по 15-20 мин.) следующие р-ры в приведенной последовательности 5 мл 20% р-ра медицинской лактозы, 2 мл 2% р-ра эозина щелочного (бактериологического), 1,5 мл 0,5% р-ра метиленового синего. Готовую среду разливают в чашки Петри, слегка подсушивают и используют как обычно. Цвет среды сине-фиолетовый.

Колонии кишечной палочки на Л. с. небольшие, округлые, с гладкой блестящей поверхностью, темно-синего (до черного) цвета, иногда с металлическим блеском. Молодые колонии мутноватые, непрозрачные, могут быть окрашены только в центре. Колонии возбудителей дизентерии, брюшного тифа и паратифов относительно более мелкие, круглые, блестящие и прозрачные, обычно совершенно бесцветные (молодые) или с легким розоватым или голубоватым оттенком. Колонии протея ползучего роста не дают; они небольшие, изолированные, оранжево-желтого цвета. Среда меняет свой цвет только вокруг колоний протея.

Некоторые авторы рекомендуют увеличивать количество 0,5% р-ра метиленового синего до 2 мл на 100 мл основной среды или исключать из ее состава фосфатный буфер. Можно готовить среду не с пептоном, а на основе перевара Хоттингера, при pH 7,2-7,3 с добавлением соответствующего прописи количества агара и фосфорнокислого калия. Применение мясной воды для приготовления среды недопустимо, дифференциация колоний в этом случае значительно ухудшается.

Известен способ приготовления сухой Л. с., очень стабильной по качеству и особенно удобной для длительного хранения и в условиях экспедиционной работы (Н. В. Плоскирев).

Стабильная сухая Л. с. выпускается промышленностью, инструкция по ее изготовлению и применению рассылается вместе со средой. Большинство диагностических лабораторий применяет для выделения и дифференцирования патогенных энтеробактерий высококачественные стандартные элективные сухие питательные среды отечественного производства - Л. с., бактоагар Ж, среду Плоскирева (см. Плоскирева среда).

Библиография: Руководство по микробиологической диагностике инфекционных болезней, под ред. К. И. Матвеева, с. 110, М., 1973; Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования, под ред. М. О. Биргера, с. 58, М., 1973; Levine М. The effect of concentration of dyes on differentiation of enteric bacteria on eosin- methylene- blue agar, J. Bact., v. 45, p. 471, 1943.

Г. П. Беликов.

Среда Раппопорта является средой обогащения и дифференциально-диагностической средой. В ее состав входит: желчный бульон 10%, 2% глюкоза, индикатор (кислый фуксин, обесцвеченный щелочью; в щелочной среде бесцветный, в кислой – красный). Назначение: для накопления тифо-паратифозных бактерий при посеве крови больного, а также для ориентировочной дифференциации тифо-паратифозных бактерий. Принцип д-я: при росте тифо-паратифозных бактерий из-за ферментации глюкозы происходит диффузное помутнение и покраснение среды. Для паратифозных бактерий, в отличие от брюшно-тифозных, наличие в поплавке газа.

Среда Эндо – дифференциально-диагностическая. Состав: МПА, лактоза, индикатор – основной фуксин, обесцвеченный сульфитом натрия. Назначение: для рассева исследуемого материала с целью получения изолированных колоний. Принцип д-я основан на способности некоторых микроорганизмов разлагать или не разлагать лактозу (сальмонеллы не разлагают и образуют бесцветные колонии).

Среда Левина является слабо селективной и дифференциально-диагностической. В ее составе МПА, тактоза, индикаторы: эозин и метиленовый синий, калий гидрофосфат. Назначение и принцип д-я см. среду Эндо.

Среда Рессела Состав: МПА, лактоза 1%, глюкоза 0,1%, индикатор (водный голубой и розоловая к-та; в щелочной среде розовая, в кислой – синяя). Назначение: для отсева «подозрительных» колоний с целью выделения чистых культур и определения их ферментативной активности по отношению к глюкозе и лактозе. Принцип д-я:

Среда Клиглера – комбинированная, дифференциально-диагностическая. Состав: МПА, лактоза 1%, глюкоза 0,1%, натрий тиосульфат, железо II сульфат, индикатор – феноловый красный (в щелочной среде – красный, в кислой – желтый). Назначение: для отсева «подозрительных» колоний с целью выявления чистых культур и определения их ферментативной активности по отношению к глюкозе, лактозе и образования Н2S. Принцип д-я: энтеробактерии, имеющие фермент тиосульфат-редуктазу, восстанавливают тиосульфат в сульфит, при этом выделяется сероводород, который реагирует с железо-сульфатом – в рез-те образуется сульфид железа черного цвета.

Серологическая идентификация выделенной чистой культуры с помощью адсорбированных монорецепторных О- и Н- агглютинирующих сальмонеллезных сывороток. Серологическая идентификация проводится в реакции агглютинации на стеке с агглютинирующими адсорбированными сальмонеллезными О- и Н-сыворотками, эти сыворотки м.б. 2-х видов: монорецепторными и поливалентными, их получают из видовых иммунных сывороток методом адсорбции антител по Кастеллани.

Серологическая идентификация протекает последовательно в 3 этапа:

1) Установление принадлежности культуры к серогруппам А, В, С, D, Е, рода Salmonella. При этом используют поливалентную О-сыворотку, содержащую антитела против антигенных рецепторов 2, 3, 4, 7, 9, 10. Монорецепторные О-сыворотки применяют против редких серогрупп. При диагностике паратифа А и В, брюшного тифа можно использовать смесь О-сывороток, сорержащих антитела к рецепторам 2, 4, 9.

2) При положительном рез-те для определения принадлежности испытуемой культуры к определенной серогруппе ставят р-цию агглютинации раздельно с каждой монорецепторной О-сывороткой, входившей в состав поливалентной: рецептор 2 относится к серогруппе А, рецептор 4 – к серогруппе В, рецептор 7 – к серогруппе С и т.д.

3) После определения серогруппы, определяем ее видовую принадлежность при помощи р-ции агглютинации с адсорбированными монорецепторными Н-сыворотками против Н-антигенов 1-й фазы сальмонелл, входящих в состав данной серогруппы. Затем проводят р-цию агглютинации с адсорбированными Н-сыворотками против Н-антигенов 2-й фазы и окончательно устанавливают антигенную формулу испытуемой культуры.

Бактерионосительство при брюшном тифе. Какими серологическими реакциями можно подтвердить хроническое бактерионосительство? Диагностикумы, используемые для этой цели. Единственным доказательством бактерионосительства является выделение от носителя культур S. typhi, S. paratyphi A, S. paratyphi B, с помощью вспомогательных методов: серологическая р-ция и алергическая кожная проба с Vi-тифином (он содержит Vi-антиген, который при взаимодействии с Vi-антителами дает местную аллергическую р-цию в виде покраснения и припухлости в течении 20-30 минут). Положительная р-ция с Vi-тифином говорит о том, что в орг-ме есть Vi-антитела и возможно S. typhi.

Хр. бактерионосительство подтверждается РНГА. При этом используются Vi-диагностикум, т.к. при формировании брюшнотифозного бактерионосительства хар-но проявление Vi-антител; диагностический титр р-ции 1:40.

Способы заражения брюшным тифом. Источник инфекции. Заражение брюшным тифом происходит только оральным путем. Источником инфекции являются больные люди и бактерионосители (представляют опасность для окружающих в течении нескольких лет после перенесенной болезни).